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基于数据挖掘及网络药理学探讨当代新安医家治疗慢性肾小球肾炎的用药规律及作用机制

更新时间:2025年06月27日阅读:43次 下载:14次 下载 手机版

作者: 胡徐磊 1 段晓韦 1 王乐 1 朱郑阳 1 吕勇 2 金华 2 王东 2 张磊 2 任克军 2

作者单位: 1. 安徽中医药大学第一临床医学院(合肥 230031) 2. 安徽中医药大学第一附属医院(合肥 230031)

关键词: 新安医学 慢性肾小球肾炎 数据挖掘 网络药理学 用药规律 作用机制

DOI: 10.12173/j.issn.1005-0698.202503053

基金项目: 安徽省自然科学基金资助项目(2208085MH269);安徽省高等学校科学研究重点项目(2023AH050749);曹恩泽全国名中医传承工作室建设项目(国中医药办人教函〔2022〕245号)

引用格式: 胡徐磊,段晓韦,王 乐,朱郑阳,吕 勇,金 华,王 东,张 磊,任克军. 基于数据挖掘及网络药理学探讨当代新安医家治疗慢性肾小球肾炎的用药规律及作用机制[J]. 药物流行病学杂志, 2025, 34(6): 676-689. DOI: 10.12173/j.issn.1005-0698.202503053.

HU Xulei, DUAN Xiaowei, WANG Le, ZHU Zhengyang, LYU Yong, JIN Hua, WANG Dong, ZHANG Lei, REN Kejun. Integrating data mining and network pharmacology to decode the therapeutic principles of contemporary Xin'an medicine for chronic glomerulonephritis[J]. Yaowu Liuxingbingxue Zazhi, 2025,34(6): 666-675. DOI: 10.12173/j.issn.1005-0698.202410045.[Article in Chinese]

摘要| Abstract

目的  基于数据挖掘结合网络药理学技术,总结归纳新安医家诊治慢性肾小球肾炎(CGN)的遣方用药规律,探讨核心药物组合的潜在作用机制,为临床治疗用药提供参考。

方法  检索电子图书数据库,从当代新安医家著作中筛选出CGN治疗相关处方,基于中医传承辅助平台V3.5进行频次统计、关联规则分析和聚类分析,挖掘高频药物(使用频次>10%)及核心组方。结合TCMSP、PubChem及SwissTargetPrediction数据库预测核心药物活性成分与潜在靶点,并通过OMIM、GeneCards等疾病数据库筛选CGN疾病相关靶点,获取交集靶点后,构建蛋白互相作用网络(STRING平台)及Cytoscape拓扑分析,利用DAVID平台完成基因本体功能富集分析及京都基因和基因组百科全书通路分析。

结果  共纳入治疗CGN相关处方151首,涉及中药213味,其中高频药物42味,以补虚、利水渗湿、清热类为主;药性寒、温、平为主,药味以甘、苦、辛为主,归经集中于肝、肺、肾、脾经。核心药物组合为“黄芪、山药、白术、白茅根、石韦、茯苓”,其关键活性成分包括槲皮素、豆甾醇、β-谷甾醇等,核心靶点涉及白细胞介素6、表皮生长因子、肿瘤坏死因子、蛋白激酶B、磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸3-激酶催化亚基α;通路富集显示其主要涉及磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B、晚期糖基化终产物-晚期糖基化终末产物受体等信号通路。

结 论  当代新安医家治疗CGN以补脾益肾、利湿清热为主,核心药物组合通过多靶点干预免疫炎症、氧化应激及纤维化通路发挥协同效应,突显中药复方多组分协同调控、多靶点交互作用的整体治疗优势,为后续进一步试验验证和临床应用提供了理论基础。

全文| Full-text

慢性肾小球肾炎(chronic glomerulonephritis,CGN)是一种以肾小球病理性损伤为特征的慢性进展性肾脏疾病,其发病率居我国慢性肾脏病首位。其以持续性蛋白尿、镜下血尿、水肿、高血压及进行性肾功能减退为典型表现[1]。目前,CGN的病理机制尚未完全阐明。西医主流观点认为,其发病与炎症、免疫功能障碍及足细胞损伤密切相关[2]。临床治疗以免疫抑制剂联合糖皮质激素为主,但长期应用此类药物易引发机会性感染、代谢性骨病及消化道出血等不良反应[3]。

中医药在CGN的诊疗中具有深厚的理论沉淀。《黄帝内经》首载“肾风”病名,《素问·风论》详述其症“面庞然浮肿,脊痛不能正立,色黑隐曲不利”,后世医家将其归属“水肿”“尿浊”“虚劳”范畴,历代医家多主张本病以脾肾亏虚为本,湿热瘀血为标,病位虽在肾,常累及肺、肝、脾三脏[4]。循证医学研究[5]表明,中医药干预可显著降低CGN患者的尿蛋白水平,且不良反应发生率低于传统免疫抑制方案,值得临床推广。

古时的“新安”主要地处皖南地区,涵盖现今休宁、祁门、歙县、黟县、绩溪等地。此地文化底蕴深厚、文教昌盛,孕育出以新安医学为代表的地域性医学流派。自宋元时期起,新安地区即有医学活动频繁的记载,至明清时期更是进入繁盛阶段。进入当代,新安医家不仅在继承古代医家学术思想的基础上不断发展,还在理论创新与临床实践中取得了显著成果。当代新安医家在诊疗理念、方药运用、学术研究等方面均展现出鲜明的地域特色与学术优势,成为推动中医药传承创新的重要力量。为深入探讨当代新安医学流派治疗CGN的组方规律及核心药物的作用机制,本研究整合数据挖掘与网络药理学技术,筛选当代新安医家CGN相关处方,分析用药规律并筛选关键靶点,最终构建“药物-成分-靶点-通路”多维网络模型,探讨中药复方多靶点协同治疗CGN的作用机制,以期为今后临床中医药治疗GCN提供诊疗思路及参考。

1 资料与方法

1.1 纳入与排除标准

1.1.1 纳入标准

①符合《肾脏病学》CGN诊断标准[6],且药物组成完整;②具有辨证思维的复诊调方记录药物加减(>3味)作为新处方纳入;③纳入处方明确记载具有确切临床疗效。

1.1.2 排除标准

①含针刺、中西药联用等非纯中药干预处方;②症状或方药记录不全的处方;③继发性、遗传性肾炎的处方。

1.2 处方来源与筛选

选取1949年至今,以程门雪、韩明向、王乐匋、曹恩泽等8位著名新安医家所著的12部代表性医籍,包括《程门雪医案》《程门雪未刊医论选集》《韩明向内科临证精华》《韩明向杏林耕耘60年》《王乐匋医学全书》《曹恩泽内科临证精华》《李济仁、张舜华临床经验集》《王任之医案》《王仲奇医案》《徐经世内科临证精华》《杏林拾穗:徐经世临证经验集粹》《国医大师徐经世医论医案撷菁》。通过安徽中医药大学中医古籍数字化平台(http://10.129.159.29/#/)、中国中医科学院图书馆(http://library.cintcm.ac.cn/)及超星电子图书数据库(http://www.sslibrary.com/)进行检索,以“慢肾风”“水肿”“尿浊”“尿血”“虚劳”“腰痛”等中医病名作为二次检索关键词,得到包含上述关键词的处方后,使用人工核查的方式,筛选其中符合“1.1”项下标准的处方。

1.3 数据规范化与质控

根据《中国药典》2020年版[7]建立标准化命名规则:①统一药材产地差异名(如“川军”命名为“大黄”,“云苓”命名为“茯苓”,“田七”命名为“三七”,“淮山药”命名为“山药”);②统一药材炮制差异名(如“生白术”“炒白术”统称“白术”,“生黄芪”“炙黄芪”统称为“黄芪”);③功效显著差异者独立录入(如“生地黄”与“熟地黄”,“川牛膝”与“淮牛膝”)。《中国药典》2020年版未收录的药物,参考《中华本草》[8]进行补充完善。

采用双人独立录入-交叉核对机制构建数据库,确保数据一致性,如2名研究人员录入结果不一致,提交第3名研究者核对并做出最终判断,确保数据准确性。将标准化数据导入Microsoft Excel 2019软件构建处方数据库,并加载至中医传承辅助平台(V3.5)进行分析与可视化处理。

1.4 数据分析

1.4.1 中药使用特征分析

在中医传承辅助平台(V3.5)“统计分析模块”分别运行“药物频次”“药性统计”“药味统计”

“归经统计”“功效统计”“用量统计”等功能,得到高频中药:全部处方中该中药出现频次 > 10%的中药,功效、药性及归经结果并生成相应图片。

1.4.2 中药关联规则分析

利用中医传承辅助平台(V3.5)的关联规则分析功能,设置置信度≥70%、支持度≥20%、最小提升度≥1.0,最大前项取2的筛选规则,得到新安医家治疗CGN核心药物配伍[9]。在关联规则中,共现度表示前项与后项共同出现的次数,Co-occurrence count(A→B)= Count(A∩B);支持度表示规则中所有项(前项与后项)共同出现的频率,Support(A→B)= P(A∩B);置信度表示前项出现时后项同时出现的概率,Confidence(A→B)=;提升度表示规则的实际关联强度与随机共现的比值:Lift(A→B)=  [10]。

1.4.3 中药聚类分析

通过中医传承辅助平台(V3.5)的“数据分析”中“聚类分析”功能,对高频中药使用K-means聚类算法:通过迭代寻找K个簇(Cluster)的一种划分方案,使得聚类结果对应的损失函数最小,得到中药聚类组合[11]。

1.5 网络药理学研究

1.5.1 核心药物活性成分及靶点筛选

结合“1.4”项下数据分析结果,选取高频药物、关联规则及聚类分析排名靠前的6味中药作为核心药物组合,利用TCMSP在线数据库(https://www.tcmsp-e.com/),提取核心药物组合全部有效化学成分。依据ADME(absorption,distribution,metabolism,excretion)参数设定筛选阈值:口服生物利用度(oral bioavailability,OB)≥30%、口服类药性(drug likeness,DL) ≥0.18,获取潜在活性成分[12]。使用PubChem数据库(https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/)检索其对应smile编号,并借助SwissTargetPrediction平台(http://www.swisstargetprediction.ch/)预测活性成分的作用靶点,经去重后获得最终靶点。

1.5.2 CGN疾病靶点获取

以“chronic glomerulonephritis”为关键词,检索GeneCards在线数据库(https://www.genecards.org/)和OMIM(https://www.omim.org/)数据库[13],筛选相关度分值(relevance score)≥6.6的疾病靶点,提取CGN相关靶点基因信息,标准化处理后构建CGN的疾病靶点库。

1.5.3 “药物-疾病”交集靶点

应用Venny2.1.0在线作图平台(https://bioinfogp.cnb.csic.es/tools/venny/),获取药物-疾病交集靶点并绘制韦恩图。

1.5.4 构建蛋白相互作用网络分析

将交集靶点导入STRING 11.0在线平台(https://cn.string-db.org/)[14]构建蛋白相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络。限定研究物种为“Homo sapiens”,设置置信度阈值≥0.7,建立PPI网络,生成TSV文件。将得到的TSV文件导入Cytoscape 3.9.1软件中,借助NetworkAnalyzer插件功能进行拓扑分析,筛选高度值(degree)关键靶点,从而识别枢纽蛋白。度值表示该节点与其他节点直接相连的边数,介度(betweenness centrality)是所有节点对之间最短路径通过该节点的比例,紧密度(closeness)表示该节点到网络中其他所有节点的平均距离的倒数。在PPI网络中,度值、介度和紧密度均为高值时,提示该节点在网络中占据关键地位,具有重要的生物学功能和调控作用。

1.5.5 构建“药物-成分-靶点”网络图

将交集靶点及其对应的活性成分、中药导入Cytoscape 3.9.1软件中,构建“药物-成分-靶点”可视化网络图。

1.5.6 富集分析

将交集靶点导入DAVID 6.8数据库(https://davidbioinformatics.nih.gov/)[15],限定物种为“Homo sapiens”显著性阈值P<0.05,分别进行基因本体(gene ontology,GO)功能富集分析及京都基因和基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路分析。获得CGN关键靶点在生物过程(biological process,BP)、细胞成分(cellular component,CC)、分子功能(molecular function,MF)的信息,提取显著性排名前10位的GO条目(按P值升序排列)以及富集度前10位的KEGG通路。利用bioinformatics微生信平台(http://www.bioinformatics.com.cn/)对上述结果进行可视化分析。

2 结果

2.1 数据挖掘

2.1.1 中药使用特征分析

共纳入8位当代新安医家所著12部代表医籍,经系统筛选纳入有效处方151首,共涉及中药213味,用药总频次达2 080次。高频药物42味,前6位依次为黄芪、山药、白术、白茅根、石韦及茯苓,如图1所示。依据《中国药典》功效分类统计显示,占比前3位分别为补虚药、利水渗湿药、清热药,如图2所示。对中药进行四气、五味、归经分析并绘制雷达图,见图3。中药药性以寒(n=724)、温(n=574)、平(n=525)为主,中药药味以甘(n=1 292)、苦(n=721)、辛(n=442)为主,中药归经主归肝经(n=938)、肺经(n=779)、肾经(n=774)、脾经(n=726)。对高频中药进行剂量分析,见表1。

  • 图1 新安医家治疗CGN处方中频率前20味中药
    Figure 1.Frequency distribution of top 20 Chinese herbs for CGN treatment in Xin'an medicine

  • 图2 新安医家治疗CGN的中药功效统计图
    Figure 2.Functional distribution of Chinese herbs for CGN treatment in Xin'an medicine

  • 图3 新安医家治疗CGN中药的药性、药味、归经统计雷达图
    Figure 3.Radar chart of properties, flavors and meridian tropism for CGN treatment in Xin'an medicine

  • 表格1 新安医家治疗CGN中药的剂量分析
    Table 1.Analysis of dosage distribution of Chinese herbs for CGN treatment in Xin'an medicine

2.1.2 中药关联规则分析

151首处方共得到19条有效关联规则,按支持度进行倒序排列,并得到药物的关联规则关系图,其中关联性最强的药物配伍以山药-黄芪、白术-黄芪、白茅根-黄芪、茯苓-白术、石韦-黄芪。见表2、图4。

  • 表格2 新安医家治疗CGN 药物关联规则分布
    Table 2.Distribution of association rules among herbal medicines for CGN treatment in Xin'an medicine

  • 图4 新安医家治疗CGN药物关联规则图
    Figure 4.Association rules network of herbal medicines for CGN treatment in Xin'an medicine

2.1.3 高频中药聚类分析

基于K-means均值聚类算法+回归模拟对治疗CGN的高频药物进行聚类分析,得到以下几组聚类组合。1类:黄芪、山药、白茅根、石韦、党参;2类:白术、茯苓、黄芪、山药、狗脊;3类:黄芪、土茯苓、牡蛎、山药、大黄。见图5。

  • 图5 新安医家治疗CGN高频药物聚类分析图
    Figure 5.Cluster analysis of herbal combinations for CGN in Xin'an medicine
    注:A. 方剂聚类分析图(K-means算法+聚类);B. 方剂聚类分析图(K-means算法+回归模拟)。

2.1.4 核心药物组合探析

综合频次统计、关联规则及聚类分析,提取核心药物组合“黄芪、山药、白术、白茅根、石韦、茯苓”,作为新安医家治疗CGN的核心药物组合。

2.2 网络药理学分析

2.2.1 药物有效活性成分及靶点筛选

利用TCMSP数据库筛选核心药物组合中各药物的有效活性成分,其中黄芪共获得有效成分20个,作用靶点个1 229个;山药共获得有效成分17个,作用靶点个646个;白术共获得有效成分7个,作用靶点个338个;白茅根共获得有效成分4个,作用靶点个98个;石韦共获得有效成分6个,作用靶点243个;茯苓共获得有效成分15个,作用靶点个880个。结合PubChem及SwissTargetPrediction数据库,经去重整合后获得有效活性成分69个,669个核心药物作用靶点。

2.2.2 CGN靶点预测

同步检索GeneCardes数据库得到CGN疾病靶点2 756个,选相关度分值(relevance score) ≥6.6的疾病靶点,得到961个CGN特异性靶点。使用OMIM数据库,检索得到CGN疾病靶点76个,经去重合并后达到CGN疾病关键靶点1 024个。

2.2.3 核心药物组合治疗CGN靶点预测

运用Venny 2.1.0平台绘制交集靶点韦恩图,获得交集靶点161个,提示核心药物组合通过多靶点协同干预CGN病理进程。见图6。

  • 图6 核心药物组合与CGN交集靶点图
    Figure 6.Intersection targets between core herbal combinations and CGN

2.2.4 核心药物组合治疗CGN的PPI网络分析

基于STRING 11.0数据库结合Cytoscape 平台对关键靶点完成可视化分析,见图7。图中节点表示靶点蛋白,度值与靶点功能重要性呈正相关:颜色越深、节点越大表示度值越大,在PPI网络中发挥关键作用。其中节点数量(number of nodes)157个,边数量(number of edges)1 199条,平均节点度值(avg. number of neighbors)为15.274,聚类系数(clustering coefficient)为0.486。根据度值对核心靶点由大到小排列,其中白细胞介素6( interleukin 6,IL-6)、表皮生长因子(epidermal growth factor,EGFR)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)、蛋白激酶B(protein kinase B,AKT1)、白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)、磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸3-激酶催化亚基α(phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate 3-kinase catalytic subunit α,PIK3CA)、Toll样受体4( toll-like receptor 4,TLR4)等呈现显著高连接度(degree≥35),提示这些靶点在CGN病理网络中处于核心调控地位。见表3。

  • 图7 核心药物组合治疗CGN的PPI网络图
    Figure 7.PPI network of core herbal combinations for CGN treatment

  • 表格3 核心药物组合治疗CGN关键靶点信息参数
    Table 3.Informational parameters of key targets for core herbal combinations for CGN treatment

2.2.5 “药物-成分-靶点”网络图

利用Cytoscape进行网络拓扑学分析,依据度值排名获得主要有效成分:槲皮素(quercetin)、豆甾醇(stigmasterol)、β-谷甾醇(beta-sitosterol)、联苯双酯(bifendate)及薯蓣皂苷元(diosgenin)等,并以此构建药物成分靶点图。复杂网络分析共得到228个节点(number of nodes),1 199条边(number of edges,平均相邻节点数(average number of neighbors)为13.474,网络密度(network density)为0.059,网络异质性(network heterogeneity)为0.826,网络中心度(network centralization)为0.158。见表4、图8。以上结果提示核心药物组合通过多成分、多靶点、多途径共同影响CGN治疗进程。

  • 表格4 核心药物组合治疗CGN的前5位活性成分
    Table 4.Top 5 active components of core herbal combinations for CGN treatment

  • 图8 核心药物组合治疗CGN活性成分靶点网络图
    Figure 8.Network map of active ingredient targets for CGN treatment with core drug combinations

2.2.6 GO与KEGG分析

DAVID 6.8平台GO功能富集分析(P<0.05)表明,核心药物组合干预CGN的BP 共富集1 561个条目,主要涉及免疫应答与炎症调控、氧化应激响应及细胞黏附动态平衡等。CC有76条,包含膜功能域、酶复合体、膜转运与黏附结构等。MF有128条,包括激酶活性与信号转导、磷酸酶互作与磷酸化调控、辅因子结合与代谢功能等。根据P值分别选取各组前10条进行可视化分析,见图9。

  • 图9 核心药物组合治疗CGN的GO富集分析图
    Figure 9.GO enrichment analysis of core herbal combinations in CGN treatment

KEGG途径分析中,颜色越红代表P值越小,节点越大代表富集目标数量越多。KEGG通路富集共获得信号通路183条,核心靶点显著富集于磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B,PI3K-Akt)信号轴、晚期糖基化终产物-晚期糖基化终末产物受体(advanced glycation end products-receptor for advanced glycation end products,AGE-RAGE)信号通路介导的氧化损伤、表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitor,EGFR-TKI)信号通路、癌症信号通路及脂代谢-动脉粥样硬化网络等,以P值作为排列依据选取前10条信号通路,绘制气泡图,见图10。

  • 图10 核心药物组合治疗CGN的KEGG通路富集分析图
    Figure 10.KEGG pathway enrichment analysis of core herbal combinations in CGN treatment

结果表明TNF、IL-6、AKT1、TLR4等枢纽靶点通过多通路交叉调控,形成“炎症-氧化应激-纤维化”交互网络,为核心药物组合多靶点协同治疗CGN提供药理学证据。

3 讨论

中医典籍将CGN归为“慢肾风”“水肿”“尿浊”“尿血”等范畴,新安医家秉承“脾肾同治”理论,主张以益气健脾固本、清热利湿化瘀为治则,契合本病本虚标实(脾肾亏虚为本,湿热血瘀为标)的病机特点[16]。桑永浩等[17]研究发现中药灌肠可以明显降低肌酐、尿素氮及炎症指标,达到改善慢性肾脏病患者的临床症状。于冬冬等 [18]研究发现针刺及艾灸可以减轻小鼠炎症反应,缓解肾脏损伤。临床研究已经证实中医药可以通过多靶点调控免疫炎症、氧化应激及纤维化等途径从而抑制肾脏疾病的进展[19-21]。以上数据表明中医在肾病治疗领域应用广泛,前景广阔。

数据挖掘结果表明,核心药物组合“黄芪-山药-白术-白茅根-石韦-茯苓”兼具补虚扶正(黄芪、山药、白术)与祛邪利湿(白茅根、石韦、茯苓)的双向调节作用,其中黄芪益气升阳、山药补气益肾、白术健脾燥湿,三药协同固护脾肾气化;白茅根与石韦清热凉血、通淋止血,茯苓淡渗利湿,共奏祛邪之功。该配伍精准对应新安医学“补泻兼施、标本同治”的诊疗理念,为复方干预CGN提供理论支撑[22],故选此组合进一步网络药理学分析。

3.1 核心药物组合治疗CGN的作用机制

CGN的病理进程与免疫介导、炎症参与、氧化应激、纤维化关系密切[23-24],网络药理学分析揭示,核心药物组合的关键活性成分多具有相关药理活性。槲皮素通过清除活性氧(reactive oxygen species,ROS)上调谷胱甘肽过氧化物酶活性水平,增强抗氧化能力[25];通过下调TNF-α、IL-1β、IL-6等促炎因子表达,减少中性粒细胞浸润及肾组织炎性损伤[26]。豆甾醇与β-谷甾醇选择性抑制环氧化酶-2活性,阻断前列腺素E2生物合成,显著减轻肾脏足细胞损伤及蛋白尿[27-28]。联苯双酯通过靶向抑制蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白通路,减少细胞外基质沉积,延缓肾间质纤维化进程[29]。薯蓣皂苷元可以促进肾小管受损细胞修复,加快代谢,增强肾脏功能[30],也能够特异性调节沉默信息调节因子6信号通路进而抗足细胞损伤,并通过促进肾小管上皮细胞线粒体生物合成加速损伤修复[31]。

蛋白质互作分析显示:活性成分显著靶向于TNF、IL-6、IL-1β、TLR4及AKT1等核心靶点。作用机制如下:TNF主要由单核细胞分泌,通过诱导肾脏固有细胞异常增殖,促进炎性介质(IL-6等)释放,直接损伤肾小球系膜细胞并破坏滤过屏障,导致蛋白尿。同时,TNF在肾间质纤维化进程中驱动肾间质成纤维细胞活化及胶原沉积,造成肾内血管血流动力异常,加速肾小球硬化[32]。IL-6由巨噬细胞及T细胞分泌,通过激活炎症反应和免疫反应,参与宿主的防御应激[33],引起肾小球系膜细胞异常增殖及细胞外基质过度沉积。此外,IL-6诱导内皮细胞毒性反应促使中性粒细胞浸润,最终导致肾组织免疫损伤,造成患者肾功能恶化[34]。IL-1β作为炎症小体下游效应分子,可以导致炎症反应的发生以及免疫应答的启动,实验证实IL-1β高表达与肾功能损伤程度呈显著正相关[35]。TLR4是脂多糖主要受体,广泛表达于肾脏固有细胞,其参与炎性反应,诱导多种炎症因子基因表达,调节天然免疫,多项研究[36-37]表明当TLR4被抑制时,可以减弱炎症反应和细胞凋亡,从而降低肾脏损伤程度。AKT1是PI3K/Akt/mTOR通路的核心调控分子,通过上调血管内皮生长因子表达破坏肾小球滤过屏障通透性,并诱发肾内微血管内皮细胞功能障碍,从而加重肾小球硬化[38]。

通路富集分析显示,核心药物组合显著调控PI3K-Akt、AGE-RAGE及EGFR-TKI等信号通路。具体机制如下:PI3K-Akt信号通路生理状态下参与细胞存活调控,病理刺激下的过度活化会抑制足细胞自噬并诱导代谢紊乱,同时通过激活mTORC1促进系膜基质扩张及胶原沉积,加速肾间质纤维化[39]。研究[40-41]已证实,抑制PI3K/Akt通路可激活叉头框O3蛋白转录因子活性,上调超氧化物歧化酶、过氧化氢酶等抗氧化酶表达,减轻ROS累积及线粒体功能障碍,从而减少肾小管上皮细胞凋亡。AGE-RAGE信号通路作为AGEs的核心效应通路,广泛参与肾脏病的炎症、氧化应激及纤维化进程。AGEs通过与RAGE结合,激活下游核因子κB信号通路,诱导肾固有细胞分泌TNF、IL-6等炎性介质,并促进单核/巨噬细胞浸润,形成慢性炎症微环境[42]。值得注意的是,AGEs还可通过RAGE依赖性途径上调烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶表达,导致线粒体超氧化物过量生成,加剧足细胞氧化损伤[43]。

3.2 化学药物治疗CGN作用机制

CGN的发病机理尚未完全阐明,现代医学认为其病理过程涉及免疫、炎症及非免疫因素[44]。①免疫因素:循环免疫复合物的形成与沉积,免疫细胞破坏肾小球结构与功能[45];②炎症参与:炎性介质产生过多损害肾脏功能;③非免疫因素:肾小球高滤过导致血流动力学紊乱,或长期存在的高血压、高血糖等危险因素导致的肾小球硬化[46]。

CGN的治疗方案主要基于免疫抑制与抗炎机制,临床常用药物包括:糖皮质激素(如泼尼松)、细胞毒药物(环磷酰胺)、钙调神经磷酸酶抑制剂(环孢素/他克莫司)及生物制剂(如利妥昔单抗)。糖皮质激素通过靶向胞内糖皮质激素受体,与促炎性转录因子(核因子κB等)竞争性结合,从而阻断促炎细胞因子(如TNF-α、IL-6)的基因转录[47-48]。环磷酰胺作为烷化剂类免疫抑制剂,选择性清除过度活化的T细胞及增殖期B细胞,其作用不仅减少自身抗体的生成,还可间接调节Th1/Th2平衡,从而调控细胞与体液免疫[49]。他克莫司通过与胞浆蛋白结合形成复合物,抑制钙调磷酸酶活性,抑制T细胞内钙依赖性信号传导通路,从而阻断一系列淋巴因子(如IL-2、IL-3)的基因转录[50]。利妥昔单抗是一种靶向CD20抗原的人鼠嵌合单克隆抗体,通过启动介导B细胞溶解的免疫反应清除B细胞,B细胞耗竭可减少自身抗体及促炎细胞因子(IL-1、TNF-α)的释放[51]。

以上结论表明化学药品与新安医家核心药物组合治疗CGN高度重合,核心组方“黄芪、山药、白术、白茅根、石韦、茯苓”通过调控不同信号通路,参与免疫炎症、氧化应激及纤维化等过程,体现中药治疗CGN多靶点、多环节、多系统协同治疗的特色。

3.3 局限性及展望

然而,本研究仍有以下局限性:①由于部分医案未明确记载证型,故未做中医辨证分型,为后续研究造成不确定性;②网络药理学预测结果需通过实验(分子对接、基因敲除/过表达)进一步验证;③复方成分的体内代谢过程及药代动力学特征尚未明确。未来研究中可结合细胞与动物实验,深入揭示“成分-靶点-通路”的动态机制。

综上所述,当代新安医家治疗CGN的核心药物组合以黄芪、山药、白术、白茅根、石韦、茯苓为主。机制研究表明:核心药物组合作用于TNF、IL-6、IL-1β、TLR4及AKT1等靶点,通过PI3K-Akt、AGE-RAGE及EGFR-TKI等信号通路干预免疫炎症、氧化应激及纤维化等进程,进而控制CGN疾病进展。新安医家在临床实践中多遵循“培土制水、固本培元”的学术思想,注重“补脾益肾固本,利湿清热治标”的治疗理念,其用药规律与免疫炎症调控等现代医学病理机制具有关联性。本文分析当代新安医学流派治疗CGN的用药规律及作用机制,从“临床-分子”维度归纳总结当代新安医学科学内涵,为复方优化及中医药现代化提供数据支持,为今后临床治疗提供一定参考。

利益冲突声明:作者声明本研究不存在任何经济或非经济利益冲突。

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