目的  采用HPLC法检测复方牙痛酊中10种成分含量，并联合化学计量学及熵权优劣解距离法对复方牙痛酊质量进行综合评价。

方法  以Diamonsil C₁₈柱为色谱柱，乙腈-0.4%磷酸为流动相，同时测定15批复方牙痛酊中缬草三酯、乙酰缬草三酯、羟基红花黄色素A、6-羟基山萘酚-3,6-双氧-葡萄糖苷、6-羟基山萘酚-3-O-β-芸香糖苷-6-O-β-葡萄糖苷、6-羟基山萘酚-3-O-β-葡萄糖苷、红花黄色素A、黄樟素乙二醇、指甲花醌、指甲花甲醚的含量，采用统计学软件对15批样品进行差异分析。

结果  10种成分分别在各自范围内线性关系良好（r≥0.999 1），平均加样回收率范围96.93%~100.12%（RSD≤1.50%，n=9）；化学计量学分析显示15批样品聚为3类；羟基红花黄色素A、指甲花醌、缬草三酯、红花黄色素A、6-羟基山萘酚-3-O-β-芸香糖苷-6-O-β-葡萄糖苷是影响复方牙痛酊产品质量的主要潜在标志物；熵权优劣解距离法可评判复方牙痛酊的质量优劣。

结论  所建立的HPLC多指标成分定量控制联合化学计量学、熵权优劣解距离法可用于复方牙痛酊质量的综合评价。

复方牙痛酊由宽叶缬草、红花、鲜凤仙花和鲜樟木组方而成，具有活血散瘀、消肿止痛的作用，临床主要用于治疗牙龈炎、龋齿引起的牙痛或牙龈肿痛[1]。该药现行质量标准及相关文献[2]仅以鲜樟木中的1~2种成分为指标进行含量测定，因溶剂中含有少量甲醇，也有文献[3]对甲醇的残留量进行了规定，但均未涉及到组方中的其他3味药材，不能保证制剂的整体质量。为更好地控制复方牙痛酊的质量，保证其药效，本试验根据中医配伍理论，以君药宽叶缬草药效成分缬草三酯和乙酰缬草三酯为首选，兼顾红花活性成分羟基红花黄色素A、6-羟基山萘酚-3,6-双氧-葡萄糖苷、6-羟基山萘酚-3-O-β-芸香糖苷-6-O-β-葡萄糖苷、6-羟基山萘酚-3-O-β-葡萄糖苷和红花黄色素A，鲜凤仙花特征成分指甲花醌和指甲花甲醚，以及鲜樟木代表性成分黄樟素乙二醇，采用HPLC法同时测定15批复方牙痛酊中上述10种成分的含量，并联合化学计量学及熵权优劣解距离法（EW-TOPSIS）对其进行综合质量评价[4-6]，旨为复方牙痛酊的整体质量控制提供依据。

1 仪器与试药

1.1 仪器

Waters Arc型HPLC仪（美国 Waters公司）；Agilent 1100型HPLC仪（美国安捷伦科技有限公司）；MS205DU型电子天平（瑞士Mettler toledo公司）。

1.2 试药

对照品羟基红花黄色素A（中国食品药品检定研究院，批号：111637-202111，含量96.8%）；缬草三酯、红花黄色素A、指甲花醌和乙酰缬草三酯（成都普瑞法科技开发有限公司，批号依次为PRF22010601、PRF8101143、PRF9042426和PRF22011101，含量均高于97.1%） ；6-羟基山萘酚-3,6-双氧-葡萄糖苷、6-羟基山萘酚-3-O-β-芸香糖苷-6-O-β-葡萄糖苷和6-羟基山萘酚-3-O-β-葡萄糖苷（批号均为CFS202101，含量均高于98.0%）、黄樟素乙二醇和指甲花甲醚（批号分别为CFS201701和CFS201901，含量均高于98.0%），这5个对照品均源于武汉天植生物技术有限公司。乙腈和磷酸（色谱纯，美国Fisher公司），甲醇（分析纯，国药集团化学试剂有限公司），试剂用水为超纯水。编号为S1~S15的复方牙痛酊[国药集团同济堂（贵州）制药有限公司，批号：200901、200912、201002、201011、201103、201105、210107、210310、210602、211004、220301、220303、220308、220404、220501，规格：10 mL/瓶]。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Diamonsil C₁₈（250 mm×4.6 mm, 5 µm）柱，柱温：30 ℃；检测波长：0~17 min在256 nm检测缬草三酯和乙酰缬草三酯[7-11]，17~ 36 min在375 nm检测羟基红花黄色素A、6-羟基山萘酚-3,6-双氧-葡萄糖苷、6-羟基山萘酚-3-O-β-芸香糖苷-6-O-β-葡萄糖苷和6-羟基山萘酚-3-O-β-葡萄糖苷、红花黄色素A[12-16]，

36~65 min在280 nm检测黄樟素乙二醇、指甲花醌和指甲花甲醚[17-19]；流动相为0.4%磷酸-乙腈（A）[9,15]，梯度洗脱（0~10 min，13.0%A；10~17 min，13.0%→20.0%A；17~36 min，20.0%→25.0%A；36~43 min，25.0%→28.0%A；43~59 min，28.0%→38.0%A；59~65 min，38.0%→13.0%A），洗脱时间为65 min，流速为1.0 mL·min-1；进样量为10 µL。

2.2 溶液的制备

2.2.1 混合对照品溶液

取缬草三酯、乙酰缬草三酯、羟基红花黄色素A、6-羟基山萘酚-3,6-双氧-葡萄糖苷、6-羟基山萘酚-3-O-β-芸香糖苷-6-O-β-葡萄糖苷、6-羟基山萘酚-3-O-β-葡萄糖苷、红花黄色素A、黄樟素乙二醇、指甲花醌、指甲花甲醚对照品适量，用70%甲醇制成质量浓度分别为0.398 0，0.214 0，1.970 0，0.192 0，0.548 0，0.312 0，1.210 0，0.108 0，0.670 0，0.596 0 mg·mL^-1的混合对照品母液，再同一溶剂将该母液稀释20倍得混合对照品溶液（上述10种对照品质量浓度分别为19.90，10.70，98.50，9.60，27.40，15.60，60.50，5.40，33.50，29.80 μg·mL^-1）。

2.2.2 供试品溶液

精密吸取复方牙痛酊5 mL，70%甲醇定容至25 mL，摇匀，过滤，即得。

2.2.3 阴性样品溶液

按质量标准分别制备缺宽叶缬草、缺红花、缺鲜樟木和缺鲜凤仙花的阴性样品，再按“2.2.2”项下方法制成4个阴性样品溶液。

2.3 系统适用性试验

分别吸取混合对照品溶液、供试品溶液及阴性样品溶液各10 µL，按“2.1”项色谱条件测定，记录色谱曲线。图谱显示供试品溶液中10种成分与相邻色谱峰的分离度均≥1.5，供试品溶液的色谱曲线有与对照品溶液色谱图保留时间一致的色谱峰，阴性样品则无；理论板数按羟基红花黄色素A计应不低于5 500，见图1。

• 
  图1 HPLC色谱图

  Figure 1.HPLC chromatograms

  注：1. 缬草三酯；2. 乙酰缬草三酯；3. 羟基红花黄色素A；4. 6-羟基山萘酚-3,6-双氧-葡萄糖苷；5. 6-羟基山萘酚-3-O-β-芸香糖苷-6-O-β-葡萄糖苷；6. 6-羟基山萘酚-3-O-β-葡萄糖苷；7. 红花黄色素A；8. 黄樟素乙二醇；9. 指甲花醌；10. 指甲花甲醚

  

2.4 多指标成分定量检测

2.4.1 线性关系考察

精密吸取“2.2.1”项下混合对照品母液0.1，0.2，0.5，1.0，2.0，5.0 mL，用溶剂定容成6个质量浓度的线性工作溶液（1~6），按“2.1”项色谱条件测定峰面积，以缬草三酯、乙酰缬草三酯、羟基红花黄色素A、6-羟基山萘酚-3,6-双氧-葡萄糖苷、6-羟基山萘酚-3-O-β-芸香糖苷-6-O-β-葡萄糖苷、6-羟基山萘酚-3-O-β-葡萄糖苷、红花黄色素A、黄樟素乙二醇、指甲花醌、指甲花甲醚对照品质量浓度（X，μg·mL^-1）为横轴，峰面积为纵轴（Y）进行线性回归，得缬草三酯等10个成分的回归方程和线性范围，结果见表1。

• 
  表格1 10个成分的线性关系与范围

  Table 1.Linearity and ranges of 10 components

  

2.4.2 精密度、稳定性及重复性试验

精密吸取复方牙痛酊（编号：S1）供试品溶液10 µL，在上述色谱条件下进样检测6次，测定缬草三酯、乙酰缬草三酯、羟基红花黄色素A、6-羟基山萘酚-3,6-双氧-葡萄糖苷、6-羟基山萘酚-3-O-β-芸香糖苷-6-O-β-葡萄糖苷、6-羟基山萘酚-3-O-β-葡萄糖苷、红花黄色素A、黄樟素乙二醇、指甲花醌、指甲花甲醚色谱曲线峰面积，得曲线峰面积的RSD依次为1.28%，1.32%，0.83%，1.40%，1.19%，1.25%，1.01%，1.53%，1.13%，1.20%，均小于2.0%（n=6），表明仪器精密度良好。

取一份复方牙痛酊（编号：S1）供试品溶液，于制备后0，2，4，7，12，18，24 h进样，记录缬草三酯、乙酰缬草三酯、羟基红花黄色素A、6-羟基山萘酚-3,6-双氧-葡萄糖苷、6-羟基山萘酚-3-O-β-芸香糖苷-6-O-β-葡萄糖苷、6-羟基山萘酚-3-O-β-葡萄糖苷、红花黄色素A、黄樟素乙二醇、指甲花醌、指甲花甲醚色谱曲线峰面积，得曲线峰面积的RSD依次为1.30%，1.29%，0.77%，1.38%，1.20%，1.22%，1.03%，1.56%，1.11%，1.18%，均小于2.0%（n=7），表明复方牙痛酊供试品溶液24 h内是稳定的。

取6份复方牙痛酊（编号：S1），各自按“2.2.2”项下方法制成供试品溶液，在上述色谱条件下测定色谱曲线，用外标法计算缬草三酯、乙酰缬草三酯、羟基红花黄色素A、6-羟基山萘酚-3,6-双氧-葡萄糖苷、6-羟基山萘酚-3-O-β-芸香糖苷-6-O-β-葡萄糖苷、6-羟基山萘酚-3-O-β-葡萄糖苷、红花黄色素A、黄樟素乙二醇、指甲花醌、指甲花甲醚的含量，得各成分含量的平均值分别为0.125，0.066，0.509，0.059，0.172，0.089，0.378，0.030，0.216，0.186 mg·mL^-1，含量的RSD依次为1.51%，1.79%，1.30%，1.61%，1.34%，1.78%，1.26%，1.86%，1.43%，1.55%，均小于2.0%（n=6），表明方法重复性良好。

2.4.3 加样回收率试验

分别吸取9份已知各成分含量的复方牙痛酊（S1）2.5 mL，每3份为一组，作为低、中、高浓度组，分别加入混合对照品溶液（缬草三酯、乙酰缬草三酯、羟基红花黄色素A、6-羟基山萘酚-3,6-双氧-葡萄糖苷、6-羟基山萘酚-3-O-β-芸香糖苷-6-O-β-葡萄糖苷、6-羟基山萘酚-3-O-β-葡萄糖苷、红花黄色素A、黄樟素乙二醇、指甲花醌、指甲花甲醚对照品质量浓度分别为0.321，0.157，1.285，0.141，0.427，0.231，0.934，0.079，0.547，0.453 mg·mL^-1）0.8，1.0，1.2 mL，照“2.2.2”项下制成加样供试品溶液并按照各组分拣对照品外标法进行测定，得10种成分平均加样回收率分别为98.04%，96.93%，100.12%，98.25%，99.07%，97.03%，100.05%，97.48%，99.36%，98.42%，RSD分别为1.01%，1.38%，0.79%，1.50%，1.09%，1.15%，0.65%，1.41%，0.72%，0.85%（n=9）。

2.5 高效液相色谱一测多评（HPLC-QAMS）相对校正因子的确定

2.5.1 相对校正因子（ƒ）的计算

精密吸取“2.4.1”项6个系列线性工作溶液各10 µL，照“2.1”项色谱条件进样，测定峰面积。以羟基红花黄色素A为含量内参物，依公式相对校正因子ƒ_ks=A_kW_s/A_sW_k（A_k和W_k分别为内参物的质量浓度和峰面积，A_s和W_s依次代表其他待测成分的质量浓度和峰面积）计算ƒ。结果缬草三酯、乙酰缬草三酯、6-羟基山萘酚-3,6-双氧-葡萄糖苷、6-羟基山萘酚-3-O-β-芸香糖苷-6-O-β-葡萄糖苷、6-羟基山萘酚-3-O-β-葡萄糖苷、红花黄色素A、黄樟素乙二醇、指甲花醌、指甲花甲醚的ƒ分别为0.937 9，1.413 8，1.934 8，0.760 0，1.078 9，0.841 9，2.578 5，0.586 8和0.666 8，显示RSD均小于2.0%，表明建立的ƒ可用于复方牙痛酊的质量评价。

2.5.2 ƒ耐用性考察

精密吸取混合对照品溶液10 µL，照“2.1”项色谱条件测定峰面积，分别考察了仪器（Waters Arc型和1100型）、色谱柱（Diamonsil C₁₈、Sepax BR C₁₈和Phenomenex Luna C₁₈）、流速：（1.0±0.2）mL·min^-1、柱温：（30±5）℃对ƒ的影响。结果不同仪器与色谱柱时，ƒ的均值分别为0.936 6，1.414 0，1.937 1，0.758 7，1.074 2，0.843 6，2.575 3，0.581 6和0.662 9，不同流速时，ƒ的均值分别为0.938 7，1.412 5，1.931 2，0.757 8，1.073 9，0.842 3，2.579 8，0.586 2和0.667 3，不同柱温时，ƒ的均值分别为0.937 7，1.415 2，1.933 8，0.761 2，1.074 3，0.844 4，2.563 2，0.587 3和0.672 6，RSD均小于2.0%，表明ƒ耐用性良好。

2.5.3 色谱峰定位

记录“2.5.2”项下采用3支色谱柱在2个HPLC仪测定的色谱峰保留时间，以羟基红花黄色素A为参照物，采用相对保留时间（t）值法对待测成分色谱峰进行定位，结果RSD≤1.65%，表明采用t值法可以对目标化合物色谱峰进行准确定位，见表2。

• 
  表格2 使用3支色谱柱在2个仪器上测定的t值结果（n=6）

  Table 2.t values determined from 2 instruments using 3 columns (n=6)

  

2.6 含量测定

取按“2.2.2”项步骤制成的15批复方牙痛酊（编号：S1~S15）供试品溶液，在上述色谱条件下测定峰面积，加载“2.4.1”项回归方程，运用外标法（ESM）计算10种成分含量；以羟基红花黄色素A为参照物，利用“2.5.1”项下公式采用HPLC-QAMS法计算另外9种成分的含量。以t、P值为统计量，采用SPSS 26.0软件对2种方法所得各成分含量结果进行配对t检验，结果显示两种方法所得结果差异无统计学意义（P＞0.05），见表3。

• 
  表格3 复方牙痛酊中10种成分含量测定结果（n=3，mg·mL-1）

  Table 3.Contents of 10 components in compound Yatong tincture (n=3, mg·mL-1)

  

2.7 化学计量学识别模式的建立

2.7.1 聚类分析（cluster analysis，CA）

以表3中HPLC-QAMS法计算结果为分析变量，利用欧氏距离为测度的平均联接（组间）法，采用SPSS 26.0软件进行CA，得图2。结果显示，当欧氏距离为10时，15批复方牙痛酊样品可以分3类，一类为样品S9、S10、S7和S8，一类为样品S1、S4、S5、S6、S3和S2，其余样品为一类。

• 
  图2 15批复方牙痛酊样品CA结果图

  Figure 2.CA results of 15 batches of compound Yatong tincture samples

  

2.7.2 主成分分析（principal component analysis，PCA）

以表3中HPLC-QAMS法测定结果为分析变量，采用降维的方式，将数据导入SPSS 26.0软件运行因子程序，提取主成分，显示成分矩阵表见表4和表5。结果前2个主成分特征值均大于1，其中主成分1的特征值为6.697，方差贡献率为66.967%，综合了乙酰缬草三酯、羟基红花黄色素A、6-羟基山萘酚-3,6-双氧-葡萄糖苷、6-羟基山萘酚-3-O-β-芸香糖苷-6-O-β-葡萄糖苷、6-羟基山萘酚-3-O-β-葡萄糖苷、红花黄色素A、指甲花醌和指甲花甲醚等成分的信息；主成分2的特征值为1.912，方差贡献率为19.124%，综合了缬草三酯和黄樟素乙二醇的信息。为进一步分析15批样品间的组间差距，将表3中HPLC-QAMS法数据导入Simca 14.1软件绘制PCA模型，见图3，同样提取出2个主成分，与PCA互应。但样品间离散程度较大，表明样品差异性较大。

• 
  表格4 复方牙痛酊的主成分分析表

  Table 4.Principal component analysis table of compound Yatong tincture

  

• 
  表格5 因子载荷矩阵

  Table 5.Component matrix

  

• 
  图3 15批复方牙痛酊PCA 得分图

  Figure 3.PCA score chart of 15 batches of compound Yatong tincture

  

2.7.3 偏最小二乘法-判别分析（partial least squares discrimination analysis，PLS-DA）

根据15批复方牙痛酊的含量，选取表3中HPLC-QAMS法含量数据为分析变量，15批复方牙痛酊的PLS-DA得分图（图4）显示15批样品批间质量差异较大，该模型的R²X=0.898、R²Y=0.754，Q²=0.672，说明模型具有良好的解释能力及预测能力，且拟合度较好。经交叉验证（n=200），R²与Q²的差异小于0.3，表明所构建的PLS-DA可有效判别分析15批复方牙痛酊的质量差异。根据变量重要性投影（VIP）筛选出差异较大成分，见图5，结果VIP＞1的有5个成分（VIP_{羟基红花黄色素A}=1.534 0、VIP_指甲花醌=1.213 0、VIP_缬草三酯=1.110 0、VIP_{红花黄色素A}=1.098 0、VIP_{6-羟基山萘酚-3-O-β-芸香糖苷-6-O-β-葡萄糖苷}=1.070 0），这5个成分可作为复方牙痛酊的质量差异性标志物。

• 
  图4 15批复方牙痛酊的PLS-DA模型得分图

  Figure 4.PLS-DA model of 15 batches of compound Yatong tincture

  

• 
  图5 PLS-DA模型中10个成分含量结果的的VIP值

  Figure 5.VIP values of 10 components in the PLS-DA model

  注：1. 缬草三酯；2. 乙酰缬草三酯；3. 羟基红花黄色素A；4. 6-羟基山萘酚-3,6-双氧-葡萄糖苷；5. 6-羟基山萘酚-3-O-β-芸香糖苷-6-O-β-葡萄糖苷；6. 6-羟基山萘酚-3-O-β-葡萄糖苷；7. 红花黄色素A；8. 黄樟素乙二醇；9. 指甲花醌；10. 指甲花甲醚

  

2.7.4 EW-TOPSIS法分析

复方牙痛酊中的缬草三酯、乙酰缬草三酯、羟基红花黄色素A、6-羟基山萘酚-3,6-双氧-葡萄糖苷、6-羟基山萘酚-3-O-β-芸香糖苷-6-O-β-葡萄糖苷、6-羟基山萘酚-3-O-β-葡萄糖苷、红花黄色素A、黄樟素乙二醇、指甲花醌和指甲花甲醚属于越大越优型指标。根据公式一对复方牙痛酊中10种成分QAMS法含量数据进行归一化处理。再将“2.7.3”项下各化学成分的VIP值作为各指标权重，与归一化后的相应数据相乘得加权决策矩阵。以矩阵中各成分对应的最大值为最优方案Z⁺，最小值为最劣方案Z^-，故最优方案Z⁺为1.110 0，0.576 0，1.534 0，0.498 0，1.070 0，0.811 0，1.098 0，0.845 0，1.213 0，0.799 0，最劣方案Z^-均为0。最后依据最优与最劣方案，按公式一、公式二和最优解的欧氏贴近度公式三，计算每批复方牙痛酊样品的Di⁺、Di^-值及Ci，结果见表6，具体公式如下：

• 
  表格6 15批复方牙痛酊的EW-TOPSIS评价结果

  Table 6.The results of EW-TOPSIS evaluation of 15 batches of compound Yatong tincture

  

3 讨论

3.1 HPLC流动相的选择

查阅相关文献，本试验考察了乙腈-水、乙腈-0.1%甲酸溶液、乙腈-0.4%磷酸溶液、乙腈-0.01%乙酸溶液等系统对复方牙痛酊中的缬草三酯、乙酰缬草三酯、羟基红花黄色素A、6-羟基山萘酚-3,6-双氧-葡萄糖苷、6-羟基山萘酚-3-O-β-芸香糖苷-6-O-β-葡萄糖苷、6-羟基山萘酚-3-O-β-葡萄糖苷、红花黄色素A、黄樟素乙二醇、指甲花醌、指甲花甲醚的响应值及分离效果，同时兼顾流动相体系pH值对色谱柱的耐受性。结果显示，以乙腈-0.4%磷酸溶液为流动相时，基线平稳，10种待测成分的检验用时、峰形及峰纯度最优，流动相体系符合色谱柱pH值适用范围要求。

3.2 供试品溶液制备

在制备供试品溶液时，首先对提取溶剂（25%甲醇、50%甲醇、70%甲醇和100%甲醇）进行了优化筛选，结果发现70%甲醇提取时，复方牙痛酊中的缬草三酯、乙酰缬草三酯、羟基红花黄色素A、6-羟基山萘酚-3,6-双氧-葡萄糖苷、6-羟基山萘酚-3-O-β-芸香糖苷-6-O-β-葡萄糖苷、6-羟基山萘酚-3-O-β-葡萄糖苷、红花黄色素A、黄樟素乙二醇、指甲花醌、指甲花甲醚提取率较高，峰面积的和最大。考虑到该制剂为液体制剂，在生产时已进行了提取，采用直接稀释摇匀的方法对比超声和加热回流，结果发现70%甲醇直接稀释摇匀时，色谱图中10种成分的色谱峰面积最大，杂质最少，同时该方法简单且环保经济，故以70%甲醇稀释摇匀为复方牙痛酊供试品提取方式。

3.3 质量评价结果分析

本试验基于中药质量标志物和中医配伍组方理论，采用高效液相色谱一测多评法对复方牙痛酊中10种化学成分进行了同时检测，方法操作便捷、结果准确可靠。从15批复方牙痛酊中10个成分含量结果来看，各指标成分含量均存在一定批间差异，表明建立复方牙痛酊多指标成分同时定量控制方法对稳定其产品质量具有重要意义，同时一测多评法有效降低了检验成本，推动了该方法的普及应用。CA和PCA评价结果显示15批复方牙痛酊样品样品聚为3类，同一生产阶段样品聚为一类，表明同一生产阶段的复方牙痛酊质量较为稳定，不同生产阶段样品存在一定的质量差异，有助于生产企业结合原药材种属、产地来源以及原药材批次，以及制剂生产过程质量控制查找引起质量差异的主要因素，为进一步稳定产品质量提供了方法；PLS-DA结果显示羟基红花黄色素A、指甲花醌、缬草三酯、红花黄色素A和6-羟基山萘酚-3-O-β-芸香糖苷-6-O-β-葡萄糖苷对复方牙痛酊质量影响较大，可能是影响复方牙痛酊产品质量的差异标志物。现代研究[20]表明红花黄色素A具有明显的扩张血管、改善心肌供血、抑制二磷酸腺苷诱导家兔血小板聚集以及抗炎等多种药理作用；羟基红花黄色素A能够抑制丝裂原活化蛋白激酶/p38/诱导型一氧化氮合酶通道，减少一氧化氮的合成和释放，显著减少醋酸所致的小鼠扭体数，提高热板所致的小鼠疼痛阈值，具有明显的抗炎镇痛作用[21]；羟基红花黄色素A、红花黄色素A和6-羟基山萘酚-3-O-β-芸香糖苷-6-O-β-葡萄糖苷等黄酮及黄酮苷类为红花主要生物活性组分，在复方牙痛酊中发挥活血止痛作用。指甲花醌为凤仙花主要活性成分，具有明显的抗菌和抗氧化活性，缬草三酯具有镇静止痛作用[22]。EW-TOPSIS法通过对10×15的矩阵数据进行合理赋权，基于赋权评价，以距离理想化目标的程度为准则对其进行排序，避免了人为因素影响，同时对多指标多数据进行处理，可更客观科学地评判复方牙痛酊的质量优劣，为更加全面地评价该产品质量，不断提升其质量控制手段提供了参考依据。

本试验采用HPLC-QAMS法对复方牙痛酊样品中缬草三酯等10个成分含量进行了同时检测，并联合CA、PCA、PLS-DA及EW-TOPSIS对其检测结果进行综合分析，所建立的方法操作便捷、结果准确，可用于复方牙痛酊的综合质量评价。

1.国家药品监督管理局. 国家药品标准WS-10589（ZD-0589）-2002-2012Z[S]. 2012.

2.汪建君, 李玲玲, 黄惠琼. GC 法同时测定复方牙痛酊中樟脑和乙酸龙脑酯的含量[J]. 药物分析杂志, 2015, 35(1): 129-132. [Wang JJ, Li LL, Huang HQ. Simultaneous determination of camphor and borneol acetate in compound Yatong tincture by GC[J]. Chinese Journal of Pharmaceutical Analysis, 2015, 35(1): 129-132.] DOI: 10.16155/j.0254-1793.2015.01.023.

3.程寿峰, 张明时. 填充柱气相色谱法测定复方牙痛酊中甲醇含量[J]. 贵州师范大学学报(自然科学版), 2012, 30(2): 68-70. [Cheng SF, Zhang MS. Quantitative determination of methanol in Fufang-yatongding by packed column gas chromatography[J]. Journal of Guizhou Normal University (Natural Sciences), 2012, 30(2): 68-70.] DOI: 10.16614/j.cnki.issn1004-5570.2012.02.009.

4.于洋,李军,李宝国,等.化学计量学在中药质量控制研究中的应用[J].中成药, 2018, 40(5): 1139-1142.[Yu Y, Li J, Li BG, et al. Application of chemometrics in quality control of traditional Chinese medicine[J]. Chinese Traditional Patent Medicine, 2018, 40(5): 1139-1142.]DOI: 10.3969/j.issn.1001-1528.2018.05.028.

5.何佳, 黄文康, 马相锋, 等. 基于主成分分析与PLS-DA分析研究浙麦冬道地性与等级评价标准[J]. 中国药学杂志, 2021, 56(4): 285-292. [He J, Huang WK, Ma XF, et al. Geoherbalism and grand evaluation of Zhejiang Ophiopogon japonicas based on PCA and PLS-DA[J].Chinese Pharmaceutical Journal, 2021, 56(4): 285-292.]DOI: 10.11669/cpj.2021.04.005.

6.张智慧, 王悦, 张学兰, 等. 基于HPLC指纹图谱与多元统计分析的生地黄与熟地黄差异评价[J]. 时珍国医国药, 2021, 32(6): 1383-1386. [Zhang ZH, Wang Y, Zhang XL, et al. The difference evaluation of raw and wine-steaming Rehmannia glutinosa based on HPLC fingerprint and multivariate statistical analysis[J]. Lishizhen Medicine and Materia Medica Research, 2021, 32(6): 1383-1386.]DOI: 10.3969/j.issn.1008-0805.2021.06.29.

7.付洋, 程盛勇, 郁林娜, 等. 一测多评法测定蜘蛛香中9个成分的含量[J]. 药物分析杂志, 2019, 39(9): 1666-1672. [Fu Y, Cheng SY, Yu LN, et al. Simultaneous determination of nine components in Valeriana jatamansi by QAMS[J]. Chinese Journal of Pharmaceutical Analysis, 2019, 39(9): 1666-1672.] DOI: 10.16155/j.0254-1793. 2019.09.17.

8.程盛勇, 付洋, 郁林娜, 等. 蜘蛛香UPLC指纹图谱研究[J]. 中药材, 2019, 42(5): 1080-1084. [Cheng SY, Fu Y, Yu LN, et al. Study on fingerprint of Valeriana jatamansi by UPLC[J]. Journal of Chinese Medicinal Materials, 2019, 42(5): 1080-1084.] DOI: 10.13863/j.issn1001-4454. 2019.05.026.

9.舒波, 刘福. HPLC法测定醒脾养儿颗粒中熊果苷,槲皮苷,缬草三酯和乙酰缬草三酯[J]. 现代药物与临床, 2017, 32(4): 584-587. [Shu B, Liu F. Determination of arbutin, quercitrin, valepotriate and acevaltrate in Xingpi Yang'er granules by HPLC[J].Drugs & Clinic, 2017, 32(4): 584-587.] DOI: 10.7501/j.issn.1674-5515.2017.04.007.

10.侯文慧, 刘勇, 王春国, 等. HPLC法同时测定蜘蛛香药材中缬草三酯类化合物及其降解产物的含量[J]. 世界科学技术-中医药现代化, 2014, 16(12): 2658-2663. [Hou WH, Liu Y, Wang CG, et al. Determination of valepotriates and their degradation products in Valeriana Jatamansi Jones by HPLC[J]. World Science and Technology/Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica, 2014, 16(12): 2658-2663.] DOI: 10.11842/wst.2014.12.024.

11.李美阳. HPLC法测定不同采集时期的北缬草中生理活性成分含量[J]. 安徽农业科学, 2013, 41(2): 604-605. [Li MY. Active ingredients content in Valeriana fauriei at different acquisition periods by HPLC method[J]. Journal of Anhui Agricultural Sciences, 2013, 41(2): 604-605.] DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2013.02.131.

12.刘晶晶, 李玉华, 安文源, 等. HPLC法测定蒙成药哈日阿-布日-16中羟基红花黄色素A的含量[J]. 中国药品标准, 2022, 23(1): 35-39. [Liu JJ, Li YH, An WY, et al. Determination of hydroxysafflor yellow Ain Mongolian Harla-Buri-16 by HPLC[J]. Drug Standards of China, 2022, 23(1): 35-39.] DOI: 10.19778/j.chp.2022.01.008.

13.兰艺凤, 周璐, 张立伟. HPLC法同时测定红花中5种黄酮成分[J]. 食品科学, 2011, 32(12): 283-286. [Lan YF, Zhou L, Zhang LW. Simultaneous HPLC determination of five flavonoid components in Carthamus tinctorius L. flowers[J]. Food Science, 2011, 32(12): 283-286.]

14.何婷, 李柯翱, 季志红, 等. HPLC同时测定红花药材中4种化学成分含量[J]. 中国中医药信息杂志, 2017, 24(4): 79-82. [He T, Li KA, Ji ZH, et al. Simultaneous determination of four chemical components in Carthamus tinctorius L. by HPLC[J]. Chinese Journal of Information on TCM, 2017, 24(4): 79-82.] DOI: 10.3969/j.issn.1005-5304.2017.04.020.

15.刘德军, 贺玲, 樊苗苗, 等. HPLC-QAMS法同时测定前列平胶囊中7种成分的含量[J]. 实用药物与临床, 2020, 23(12): 1119-1125. [Liu DJ, He L, Fan MM, et al. Quantitative determination of seven components in Qianlieping capsule by HPLC-QAMS[J]. Practical Pharmacy And Clinical Remedies, 2020, 23(12): 1119-1125.] DOI: 10.14053/j.cnki.ppcr.202012013.

16.王玉娟, 崔苏镇, 陶利, 等. HPLC梯度洗脱法同时测定舒心降脂片中8种成分的含量[J]. 中国药师, 2020, 23(10): 2039-2042. [Wang YJ, Cui SZ, Tao L, et al. Simultaneous determination of eight constituents in Shuxin Jiangzhi tablets by HPLC gradient elution method[J]. China Pharmacist, 2020, 23(10): 2039-2042.] DOI: 10.3969/j.issn.1008-049X.2020.10.039.

17.陈桃香, 吴海燕, 李春宁, 等. 苗药凤仙花的提取工艺优选及质量标准的研究[J]. 贵州科学, 2022, 40(2): 34-38. [Chen TX, Wu HY, Li CN, et al. Study on the optimum extraction process and quality standard of Miao medicine impatiens balsamina[J].Guizhou Science, 2022, 40(2): 34-38.] DOI: 10.3969/j.issn.1003-6563.2022.02.008.

18.吴海燕, 李春宁, 胡成刚, 等. 黔产凤仙花中2-甲氧基-1,4-萘醌的含量测定[J]. 贵州科学, 2020, 38(4): 16-19. [Wu HY, Li CN, Hu CG, et al. Determination of the content of 2-methoxy-1,4-naphthoquinone in Impatiens balsamina from Guizhou[J].Guizhou Science, 2020, 38(4): 16-19.] DOI: 10.3969/j.issn.1003-6563.2020.04.004.

19.王芳, 王宝华, 丁磊, 等. 凤仙花的指纹图谱研究及2种1,4-萘醌成分的含量测定[J]. 西北药学杂志, 2018, 33(1): 24-28. [Wang F, Wang BH, Ding L, et al. Establishment of fingerprints and simultaneous determination 2 kinds of 1,4-nsphthoquinone in Impatiens balsamina L.[J]. Northwest Pharmaceutical Journal, 2018, 33(1): 24-28.] DOI: 10.3969/j.issn.1004-2407.2018. 01.006.

20.李秋宇. 红花黄色素A对脓毒症大鼠血清细胞因子的调控和凝血机能的影响[D]. 昆明: 云南中医学院, 2015.

21.李响, 俱蓉, 李硕. 红花化学成分药理作用研究进展及质量标志物预测分析[J]. 中国现代中药, 2021, 23(5): 928-939. [Li X, Ju R, Li S. Research progress on chemical constituents and pharmacological effects of carthamus tinctorius and predictive analysis on quality markers[J].Mod Chin Med, 2021, 23(5): 928-939.] DOI: 10.13313/j.issn.1673-4890.20200321001.

22.韩基红, 富小珺. 缬草的药用价值研究进展[J]. 世界最新医学信息文摘, 2017, 17(24): 28-29. [Han JH, Fu XJ. Research progress on medicinal value of valerian[J].World Latest Medicine Information, 2017, 17(24): 28-29.]DOI: 10.3969/j.issn.1671-3141.2017.24.012.